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Radiomarcaje y estudios de biodistribución de nanopartículas poliméricas como adyuvantes para vacunación oftálmica frente a brucelosis

机译:高分子纳米粒子作为佐剂用于预防布鲁氏菌病的眼科疫苗的放射性标记和生物分布研究

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摘要

ObjetivosOptimizar el radiomarcaje con 99mTc de nanopartículas de Gantrez® manosiladas y cargadas con el antígeno de Brucella Ovis (Man-NP-HS) y llevar a cabo estudios de biodistribución en ratón tras la administración de las nanopartículas por vía ocular.MetodologíaLas Man-NP-HS se obtuvieron por el método de desplazamiento de disolvente. Se purificaron, liofilizaron y caracterizaron. A continuación, se marcaron con 74 MBq de 99mTcO4− previamente reducido con una disolución ácida de cloruro de estaño, trabajando en ausencia de oxígeno y con un pH final de 4. El rendimiento del marcaje se evaluó mediante TLC. Los estudios de biodistribución se llevaron a cabo en ratones tras la administración oftálmica de la formulación y de un control de 99mTcO4− libre. Para ello, se sacrificaron los animales a las 2 y a las 24 horas tras la administración ocular y se contaron los órganos en un contador gamma.ResultadosSe obtuvo un rendimiento de marcaje superior al 90%. Los estudios de biodistribución de 99mTc-Man-NP-HS permitieron detectar la actividad concentrada en mucosa nasal y ocular y tracto gastrointestinal tanto a las 2 como a las 24 horas, frente a la biodistribución de 99mTcO4− libre que permaneció concentrado en la piel alrededor del ojo y en tracto gastrointestinal.ConclusiónLos estudios de biodistribución de 99mTc-Man-NP-HS tras administración oftálmica han permitido demostrar su biodistribución en mucosas y tracto gastrointestinal, característica indispensable como sistema de liberación de antígenos a través de mucosa ocular. Esto, junto con su elevada respuesta inmune, efectiva protección y no virulencia, convierte a estas nanopartículas en una vacuna ideal anti Brucelosis.
机译:目的:优化负载有布鲁氏菌羊抗原(Man-NP-HS)的甘露糖基化的Gantrez®纳米颗粒的99mTc放射性标记,并通过眼部施用纳米颗粒后在小鼠中进行生物分布研究。 HS通过溶剂置换法获得。将它们纯化,冻干并鉴定。然后用74 MBq的99mTcO4-标记,事先用酸性氯化锡溶液还原,在无氧条件下工作,最终pH为4。标记性能通过TLC评估。眼部给药该制剂和游离的99mTcO4-对照后,在小鼠中进行了生物分布研究。为此,在眼部给药后2和24小时处死动物,并在γ计数器中计数器官,结果:获得了超过90%的标记产率。 99mTc-Man-NP-HS的生物分布研究可以检测到在2和24小时集中在鼻和眼粘膜以及胃肠道的活性,而游离的99mTcO4−仍然集中在周围的皮肤中。结论:眼科给药后99mTc-Man-NP-HS的生物分布研究表明其在粘膜和胃肠道中的生物分布,这是通过眼粘膜作为抗原释放系统的基本特征。加上它们的高免疫反应,有效的保护和无毒力,这些纳米颗粒成为理想的抗布鲁氏菌病疫苗。

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